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精工致善丨火山圖繪制
什么是火山圖?
火山圖是散點(diǎn)圖的一種,它將統(tǒng)計測試中的統(tǒng)計顯著性量度(如p-value)和變化幅度相結(jié)合,從而能夠幫助快速直觀地識別那些變化幅度較大且具有統(tǒng)計學(xué)意義的數(shù)據(jù)點(diǎn)(代謝物等)。是一種單變量統(tǒng)計分析方法,常應(yīng)用于研究基因組、轉(zhuǎn)錄組、代謝組、蛋白質(zhì)組等數(shù)據(jù)分析。
如何繪制火山圖?
操作流程
1.進(jìn)入在線分析軟件
2.上傳數(shù)據(jù)
2.1.準(zhǔn)備數(shù)據(jù)文件
1)需要有樣本名和樣本分組信息,文件格式需為制表符分割的TXT文件或逗號分割的CSV文件。
2)靶標(biāo)中不能有希臘字母α、β等,用alpha、beta等替換。
示例1:
2.2文件上傳
1)數(shù)據(jù)類型選擇濃度;
2)數(shù)據(jù)格式選擇樣品在每一列(未配對),可根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)實(shí)際情況選擇樣品在每一行或是每一列、配對或未配對實(shí)驗(yàn);
3)選擇整理好的文件上傳,提交即可。
2.3檢查數(shù)據(jù)格式
檢查數(shù)據(jù)格式,是否有非數(shù)值數(shù)據(jù)、缺失值或其它特殊字符和標(biāo)點(diǎn)符號。
注意:軟件會默認(rèn)將缺失值及零值替換為其對應(yīng)變量的最小正值的1/5。
2.4數(shù)據(jù)處理
3.數(shù)據(jù)分析
3.1選擇分析項(xiàng)目
3.2參數(shù)設(shè)置
1)填寫FC閾值,一般為2。P-value閾值一般為0.05。也可根據(jù)自己實(shí)際情況調(diào)整。
2)點(diǎn)擊提交即可
4.圖形解讀
4.1火山圖
圖中每個點(diǎn)代表一個檢測到的靶標(biāo)。橫軸是Log2(fold change),點(diǎn)越偏離中心,表示差異倍數(shù)越大。縱軸是-Log 10 ( P-value),點(diǎn)越靠圖的頂部表示差異越顯著。點(diǎn)的顏色標(biāo)記其對應(yīng)的靶標(biāo)是上調(diào), 下調(diào)還是無差異。P值<0.05且FC>2的表現(xiàn)為紅色點(diǎn),說明該靶標(biāo)上調(diào),P值< 0.05且FC < 2的表現(xiàn)為藍(lán)色點(diǎn),說明該靶標(biāo)下調(diào)。
4.2箱形圖
點(diǎn)擊火山圖中的點(diǎn)即可顯示原始濃度數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)歸一化處理后的箱形圖,可幫助快速識別異常值。
5.繪圖平臺
登入鏈接:https://www.metaboanalyst.ca/
MetaboAnalyst是一個代謝組學(xué)數(shù)據(jù)分析的綜合平臺。當(dāng)前的MetaboAnalyst (V5.0)支持原始MS光譜處理、綜合數(shù)據(jù)歸一化、統(tǒng)計分析、功能分析、薈萃分析以及與其他組學(xué)數(shù)據(jù)的綜合分析。